在医药行业飞速发展的今天，药品的安全性和质量控制越来越受到社会各界的关注。特别是亚硝胺类杂质，因其潜在的致癌风险，已经成为国内外监管机构的重点监控对象。本文将基于CDE发补要求，详细介绍酰胺类结构形成亚硝胺杂质的评估方法及其重要性。

　　一、酰胺类亚硝胺的致突变机制

　　亚硝胺类杂质的致突变机制主要有两种：1.普通亚硝胺：通过Cyt P450酶的作用，形成活性碳正离子。2.酰胺类化合物：主要通过重排反应形成亚硝胺。

　　亚硝胺在体内的毒性作用需要经过代谢活化，这与N-亚硝基脲（直接产生重氮化物或R自由基）的机制不同。虽然部分亚硝基化合物的毒性机制尚未有确切结论，但由于亚硝胺类化合物在药品中出现的概率较高，它们自然成为了监管机构关注的重点。

　　基于丰富的基础数据和大数据的回顾分析，欧美的毒理学专家和监管机构总结了一套CPCA（Chemical Property and Classification Algorithm）控制方法。通过CPCA自动分类计算软件//ndsris-cpca-in-silico-tool.streamlit.app，输入化合物结构后，软件会计算亚硝胺类杂质的分类（1-5级），并给出相应的控制限度。

　　二、酰胺类化合物生产亚硝胺杂质的风险评估

　　为了评估和控制酰胺类化合物中亚硝胺杂质的风险，可以采用以下三种实验条件：

　　条件1

       试剂：胺源、乙酸、亚硝酸钠水溶液（1.5当量）浓度：总的反应物质浓度约为0.1mol/L（不足时可加水调整）温度：20~25℃容器：尽量采用最小的密闭容器以避免NOx的挥发注意事项：不加任何溶剂，反应液可以是浆状的，确保所有反应物充分搅拌均匀。

　　条件2

       试剂：胺源、稀盐酸调节pH值、亚硝酸钠水溶液（1.5当量）浓度：总的反应物质浓度约为0.1mol/L（不足时可加水调整）温度：20~25℃容器：尽量采用最小的密闭容器以避免NOx的挥发注意事项：随时监控并调节反应的pH值，不加任何溶剂，反应液可以是浆状的，确保所有反应物充分搅拌均匀。

　　条件3

       试剂：胺源、能溶解胺的有机溶剂、亚硝酸叔丁酯浓度：总的反应物质浓度约为0.1mol/L温度：20~25℃容器：尽量采用最小的密闭容器以避免NOx的挥发注意事项：整个反应也可以用核磁管加入氘代溶剂，用核磁进行检测。需要注意的是，这种方法制得的亚硝胺杂质在水相下可能不稳定，这种不稳定性可以作为亚硝胺杂质不易生成的证据。

　　按标准的有关物质方法检测，所有超过0.5%的杂质需进行质谱确认。如何质谱确认可能存在亚硝胺杂质，建议将杂质制备分离，进行结构确证，以排查假阳性的风险（如C-亚硝化，O-亚硝化，肟等）如果检测发现了显著的杂质，需对该杂质进行结构确认，以识别致突变。（可能也是基因毒性杂质）

　　总结：若经由上述三个条件验证，确定目标物质中不会产生亚硝胺杂质，则可证明该亚硝胺杂质不存在形成风险。

　　三、亚硝胺杂质相关网站推荐

　　为了帮助大家更好地了解和控制亚硝胺杂质，以下是几个推荐的网站：

　　FDA网站：//www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/cder-nitrosamine-impurity-acceptable-intake-limits提供与原料结构相关的亚硝胺类基因毒性杂质的摄入限度，网站收录了270多个原料药相关的亚硝胺杂质信息，并会持续更新。

　　USP的Naiffer数据库：//public.tableau.com/app/profile/naiffer.romero/viz/NitrosaminesRegulatoryAILimits/Dashboard1收集了各国亚硝胺杂质的限度信息，包括EMA、FDA、HCAN、TGA等，可以查询原料相关的基因毒性杂质和常规小分子亚硝胺类基因毒性杂质的限度。

　　通过科学的风险评估和有效的控制措施，ag真人平台官方可以最大限度地减少亚硝胺类杂质对公众健康的潜在威胁。希望本文能够为相关领域的专业人士提供有价值的参考和帮助。