小麦种子纯度是指种子中所含的杂质和纯种粒的比例,是衡量种子质量好坏的重要指标之一。
《中华人民共和国种子法》颁布实施后,对农作物的种子在纯度、净度、发芽率及水分4个指标上具有强制性质量要求,GB 4404.1-2008《粮食作物种子第1部分:禾谷类》规定小麦原种纯度不低于99.9%,大田用种不低于99.0%。
对于小麦育种和种子生产来说,准确快速地检测种子纯度非常关键。
1、苯酚染色
苯酚染色法属化学测纯方法,它是利用苯酚溶液的蒸气与果皮成分发生化学反应而表现特定的颜色,品种不同果皮有着不同的显色反应,从而将混杂的异品种种子区别开来达到测定种子纯度的目的。
苯酚染色法是室内测定种子纯度快捷、简便的方法,可用于测定小麦、大麦、燕麦、水稻及早熟禾等禾本科作物,已列入我国GB/T 3543.5-1995《农作物种子检验规程》,成为小麦种子室内纯度快速测定的标准方法。
但这种方法对于遗传背景相近的如近等基因系、实质性派生品种等,有效性较差且主观性强,无法对种子进行精确检测。
2、SSR技术
近年来,分子生物学的发展使品种纯度的检验进入到基因水平。
SSR技术(分子鉴定)是以品种DNA片段作为检测对象,采用电泳方法检测基因组DNA结构与组成,通过分析DNA水平上的差异来检验品种纯度,有很高的准确性、稳定性和重复性,因而可以鉴定品种的真实性和纯度。
目前农业部标准NY/T 3749-2020《普通小麦品种纯度鉴定SSR分子标记法》也规定了利用聚丙烯酰胺凝胶电泳来鉴定小麦品种纯度的方法。
聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法,在这种支持介质上可根据被分离物质分子大小和分子电荷多少来分离。
聚丙烯酰胺凝胶电泳适宜分离鉴定低分子量蛋白质、小于1Kb的DNA片段和DNA序列分析,其装载的样品量大,回收DNA纯度高,最高分辨率可达1bp,适用于微卫星等位基因间的差别检测。
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