CLDN18.2表达对胃癌预后及其免疫微环境的影响-CTI华测检测官方商城

胃癌（GC）是全球第五大最常见的癌症，也是癌症相关死亡的第四大原因。大多数GC病例诊断为晚期，导致患者预后不良。虽然临床已应用了几种分子靶向药物，但只有靶向HER2的曲妥珠单抗和免疫检查点抑制剂（如帕博利珠单抗或纳武利尤单抗）显示出有效的缓解率，并被确定为晚期GC的标准一线治疗。因此，迫切需要开发新的治疗靶点和精准的治疗方案，以提高晚期GC患者的生存率。

Claudins（CLDN）是一类紧密连接蛋白，可调节上皮细胞的选择性通透性和离子稳态，并介导细胞间粘附。人类 claudin 基因家族由 27 个已知成员组成，每个成员都以不同的方式选择性地促进带电和不带电溶质的通过。Claudin 表达决定了细胞旁通透性，并且特定 Claudin 家族成员的表达因组织而异。在胃中，claudin-18（CLDN18.2）是最丰富的形式，而claudin-18.1主要在肺中表达。然而，由 CLDN18 基因编码的 claudin-18 （CLDN18.2）亚型 2 因其位于胃粘膜细胞的紧密连接内，通常无法与抗体反应。然而，在恶性转化和细胞极性丧失期间，CLDN18.2暴露在肿瘤细胞表面，并在原发性胃癌及其转移瘤中表达。这些独特的特征引起了人们对CLDN18.2作为GC潜在治疗靶点的作用的关注。

Zolbetuximab是一种首创的嵌合单克隆IgG1抗体，与CLDN18.2结合，通过抗体依赖性细胞毒性（ADCC）和补体依赖性细胞毒性（CDC）机制诱导肿瘤细胞死亡。一项全球III期随机试验（SPOTLIGHT）的最新结果显示，在CLDN18.2阳性和HER2阴性晚期胃癌或胃食管交界处腺癌中，与单独使用mFOLFOX6相比，唑贝妥昔单抗联合mFOLFOX6显著降低了患者的疾病进展或死亡风险。

方法学

共收集451个GC患者肿瘤组织、342个癌旁组织和107个匹配的转移性淋巴结。对这些标本进行 CLDN18.2 表达染色，并使用免疫组化（IHC）进行定量。分析CLDN18.2表达与临床病理特征以及免疫相关因素的相关性。使用 Kaplan\u2012Meier 方法绘制生存曲线，并使用 Cox 回归分析确定影响 GC 预后的独立因素。

结论

CLDN18.2 在肿瘤组织中低水平表达，可作为 GC 患者的独立预后因素。此外，CLDN18.2 与免疫浸润细胞和 PD-L1 表达相关。

结果 1

CLDN18.2 在胃肿瘤中低水平表达，与患者的预后呈负相关

在肿瘤组织样本中，共245个样本（54.32%）CLDN18.2表达阳性；206个样本呈阴性。代表性CLDN18.2的IHC染色如下图A 所示。在342例有匹配样本的患者组织中， CLDN18.2在187个（54.68%）肿瘤组织和 339 个（99.12%）癌旁组织中表达。CLDN18.2高表达（H评分≥6）在肿瘤组织中显著低于癌旁组织中（下图B，27.19% vs80.7%，p<0.001），表明CLDN18.2在胃肿瘤中表达低。CLDN18.2 在胃肿瘤组织和匹配的转移性淋巴结中表达无显著差异（下图1C，p=0.851）。

利用 Kaplan‒Meier 生存曲线分析CLDN18.2对胃癌生存率的影响。CLDN18.2的阳性表达与GC患者的总生存期（OS）较短相关（下图D，P = 0.026）。然而，CLDN18.2表达水平高的患者预后并不明显低于CLDN18.2表达水平低的患者（下图E）。这些发现表明胃肿瘤组织中CLDN18.2的表达水平与患者预后之间存在潜在的负相关。

结果 2

CLDN18.2蛋白表达与临床病理特征的关系

基于本研究数据，CLDN18.2在胃癌中的表达水平与各种临床病理特征几乎没有显著相关性，但PD-L1表达水平（p=0.004）除外。值得注意的是，这种缺乏显著相关性可能是由于分析中使用的分组变量方法。为了进一步研究CLDN18.2表达水平与特定临床病理特征之间的关系，ag真人平台官方分析了与Borrmann型（单样本t检验）、Lauren型（单因素方差分析）和分化等级（单因素方差分析）的相关性（上图F-H）。分析显示，CLDN18.2在Borrmann I型和II型中的表达水平高于Borrmann III 型和IV型（p = 0.001）。此外，胃肿瘤低分化程度与高CLDN18.2表达水平之间存在很强的相关性（p = 0.0098）。这些发现表明，CLDN18.2表达水平与肿瘤分化程度、Borrmann类型和PD-L1 表达水平相关。

结果 3

CLDN18.2是胃癌的独立预后标志物

Cox回归分析被用以探索可能影响胃癌（GC）预后的因素。在单因素Cox分析中，发现CLDN18.2阳性表达与总生存期（OS）显著相关（P=0.028）。此外，年龄、pT分期、pN分期、pTNM分期、肿瘤位置和肿瘤大小也被确定为单因素分析中的重要因素（下表，P<0.05）。

多因素Cox分析进一步检查在单因素分析中显示显著性的数据。结果显示，CLDN18.2表达与OS（HR = 1.37,95%CI = 1.03–1.81，P = 0.031），以及年龄、pN分期和肿瘤大小（如下图，P<0.05）之间存在显著关联。这些发现表明，CLDN18.2的表达可能是胃癌的独立危险因素。

结果 4

CLDN18.2表达可调节GC免疫微环境

根据TISIDB数据库在对胃癌（GC）患者免疫微环境的检查中，观察到 CLDN18.2 表达水平与 CD4 + T细胞、CD8 + T 细胞和B细胞之间存在很强的相关性。然而，在检查TIMER数据库时，发现CLDN18.2表达水平与CD8 + T细胞和Foxp3表达水平相关（p < 0.05），但与 CD4 + T细胞、B细胞、CD274（PD-L1）表达水平以及ERBB2（HER2）表达水平无关。

在本文对451个GC样本中使用IHC方法评估HER2表达和使用联合阳性评分（CPS）评估 PD-L1表达时，发现HER2和PD-L1表达水平均未显着影响患者的总生存期（OS）（下图 A、B）。HER2和PD-L1在肿瘤组织中的阳性表达率高于癌旁组织（p < 0.05，下图C，F），但与转移性淋巴结相比无显著差异（下图D，G）。本文观察到CLDN18.2表达水平和PD-L1 表达水平呈正相关（p = 0.004，下图H），但未发现与HER2表达水平的显著相关性（下图E)。

在使用免疫组化（IHC）对358名患者评估肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）和肿瘤组织中Foxp3 的表达时，CD4 + T细胞或CD8 + T细胞水平高的患者表现出更好的预后（下图C，E，p < 0.05）。然而，CD3 + T细胞水平和Foxp3表达对GC患者的预后没有显著影响（下图A，G）。此外，还发现CD3 + T细胞和CD8 + T细胞的数量与CLDN18.2表达水平呈正相关（下图B，F），但CD4 + T细胞和Foxp3并不适用（下图D，H）。

结果 5

CLDN18.2- + CD4high状态和CLDN18.2- + CD8high状态的患者预后更好

本文在研究CLDN18.2与肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）、PD-L1、HER2或Foxp3对胃癌（GC）预后的联合影响时进行了Kaplan‒Meier生存分析（如下图）。分析表明，CLDN18.2−+ CD4high组预后最好，5年总生存率（OS）为61.0%。相比之下，CLDN18.2 + +CD4low组预后最差，5年OS率为45.3%（下图A，P = 0.036）。CLDN18.2联合CD8+T细胞的预后分析显示相似的结果。The CLDN18.2−+ CD8high组患者预后最好，5年OS率为62.2%（下图C，p = 0.034）。另一方面，CLDN18.2 与 CD3 + T 细胞、HER2、PD-L1 或 Foxp3 的联合分析未显示预后有统计学意义的差异（下图A， D-F， p > 0.05）。总之，CLDN18.2阴性状态与高水平的CD4 + T细胞或CD8 + T细胞相结合，预示着GC的预后良好。

参考文献

Wang C, Wang Y, Chen J, Wang Y, Pang C, Liang C, Yuan L, Ma Y. CLDN18.2 expression and its impact on prognosis and the immune microenvironment in gastric cancer. BMC Gastroenterol. 2023 Aug 16;23(1):283. doi: 10.1186/s12876-023-02924-y. PMID: 37582713; PMCID: PMC10428652.